细胞计数专题 | 如何减少台盼蓝沉淀

细胞计数专题 | 如何减少台盼蓝沉淀

台盼蓝(Trypan Blue)是一种在生物学研究中广泛使用的染料,尤其常用于细胞活力检测。当细胞死亡时,其细胞膜会变得对台盼蓝具有通透性,染料因而能够进入细胞并与细胞内的蛋白质结合,产生染色效果。由此,膜完整的活细胞保持不被染色,而死亡细胞则被染成蓝色。这一原理是台盼蓝排除法(Trypan Blue Exclusion Assay)的基础,该方法也是评估细胞活力的一种常见手段。

然而,人们普遍发现,实验室中使用的台盼蓝染色液在不同的储存条件下容易发生沉淀。一旦染色液发生沉淀,将很难继续用于细胞染色实验。

本文将探讨台盼蓝沉淀的成因以及如何恢复沉淀的台盼蓝溶液,使其能够重新用于细胞染色。

台盼蓝的沉淀现象

台盼蓝溶液的沉淀现象相当常见,且在储存过程中随着外界温度的降低沉淀会增加。

图 1. 不同外界温度下储存至第4周时,两家不同制造商生产的台盼蓝溶液(0.4%液体溶液,1 mL)的对比情况

台盼蓝沉淀去除

将产生沉淀的台盼蓝溶液加热至 37℃ 并保持 10 分钟,已被证明能够有效去除沉淀。

图 2. Logos Biosystems 台盼蓝溶液(0.4%液体溶液)在 4℃ 和 -20℃ 条件下储存至第4周时的对比,以及随后加热至 37℃ 并保持 10 分钟后的变化情况

产品详细信息

台盼蓝染料是一种用于评估细胞活力的重要染料。活细胞的细胞膜完整,因此不会被染色保持无色;而死亡细胞由于细胞膜受损,会被染成蓝色。

台盼蓝染料常与 点成LUNA™ 系列细胞计数仪配合使用,用于明场细胞计数。台盼蓝染料是一种有毒化合物,因此在操作时用户需采取必要的防护措施(例如佩戴手套)。在加热台盼蓝溶液时,必须确保试管盖密闭,以避免接触其有毒性成分。

台盼蓝染料,0.4%   T13001

分子式

C34H28N6O14S4

分子量

872.88 g/mol

外观

深蓝色液体

细胞渗透性

不能透过细胞膜

数量

2支装,每支1毫升

储存条件

室温

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