自动细胞计数仪因其能够快速、精确地提供细胞计数结果而广受欢迎。尽管有这些优点，但验证其准确性以确保可靠的细胞计数结果至关重要。微球常被用于验证流式细胞仪和自动细胞计数仪等设备。但使用微球存在各种问题，促使了细胞计数仪验证载玻片的研发，用于验证点成LUNA™细胞计数仪系列。
在本文中，我们将探讨细胞计数标准，以及使用细胞计数仪验证载玻片来验证点成LUNA™细胞计数仪系列的优势。
一、国际细胞计数标准
ISO 20391 标准的制定是为了为准确的细胞计数提供指导，并确保细胞计数结果的可靠性。该标准概述了一种通过系列稀释实验来验证细胞计数测量质量的方案，当没有参考材料时可以使用该方案。然而这个过程可能既耗时又复杂，需要进行复杂的计算来确定决定系数和比例系数。
为了克服这一挑战，建议使用参考材料以确保测量的可追溯性、便于进行比较并验证测量过程。最有效的方法是将平均分析结果与从有证参考材料中获得的参考值进行比较，从而无需进行复杂的计算。尽管如此，选择合适的参考材料仍然面临挑战。
二、使用验证微球作为参考材料的挑战
验证微球，如美国国家标准与技术研究院（NIST）微球，常被用作涉及粒径和计数的各种分析方法中的参考材料。这些微球具有已知的大小和浓度，常被用作流式细胞术、显微镜检查和其他类似技术的校准标准。但是NIST 微球没有荧光形式，不适合测试细胞活力。
虽然商用荧光微球可以作为替代，但移液过程中的误差以及长期储存期间的蒸发可能会影响其准确性，这需要小心处理和反复测试。因此目前没有可用于细胞活力评估的商用参考材料。
选择自行在内部制备参考材料的用户将不得不依赖手动计数，手动计数相对不精确，并且需要大量的样本。或者可以使用流式细胞术，尽管获得绝对计数结果可能具有挑战性，这种方法不太方便用户操作。因此需要找到一种替代的细胞活力评估方法。
三、使用验证载玻片作为参考材料
使用具有稳定性和一致性的参考材料对于确保细胞计数的准确结果至关重要。一种能够提供这种质量控制水平的选择是使用验证载玻片。这些载玻片包含预先点样的图案或预先固定的荧光微球，上面有已知数量的物体，消除了诸如因样本加载导致的浓度变化、储存期间的蒸发或分布不均等问题。
此外，验证载玻片允许使用细胞计数仪的明场和荧光光学系统来验证总细胞计数和细胞活力。与其他设备进行交叉验证也很简单，并且其稳定性确保即使长期储存或反复使用，测量值也能保持一致。通过使用验证载玻片，研究人员可以节省原本用于进行额外实验以确保准确性的时间和资源。
四、如何使用细胞计数仪验证载玻片评估准确性
细胞计数仪验证载玻片方案通过提供一种简单而高效的替代微球的方法，简化并改进了验证细胞计数仪准确性的过程。这种方法节省了时间，并提供了一种简便的方法来验证细胞计数结果的准确性。
要使用细胞计数仪验证载玻片方案，请按照以下简单步骤操作：1)检查细胞计数仪验证载玻片标签上的细胞浓度和细胞活力值。2)将载玻片插入细胞计数设备中。3)使用 “IQOQ” 方案开始计数。4)记录总细胞浓度和细胞活力值。
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