其工作原理是以光密度测量为基础，以McFarland为单位进行数字结果表示。在相同波长下，形状规则的（近似球形）微生物菌浓度和吸光度有线性关系，因此可通过捕获相关反射光的光特征表征样品浓度。

DEN-1和DEN-1B为565nm，DEN-600为600nm。由于不同菌株的菌液最大吸收波长不同，所以在选择仪器时可根据自己主要研究的检测物质进行选择，一般行业内通用550-660nm进行测量，因为550-660nm是大部分近似球形的细菌最大的吸收波长范围，在该波长范围下物质浊度的响应更加敏感。

区别在于：①分光光度计需要特定波长（选择何种波长取决于溶液的颜色），因为只有在最大吸光光度时，检测灵敏度最高，误差最小，重复性最好，细菌浊度仪对光线波长要求不高。②分光光度计主要检测的是可溶性物质，而比浊仪是检测非可溶性（有浊度）的物质。③前者在通过溶液后，光波可能会发生改变，后者不会。
基于上述不同，比浊仪和分光光度仪不可互相代替。

玻璃和透明塑料样品管都可以，只需试管外径为16mm或18mm，若使用外径16mm试管可搭配D16适配器（标配）使用。注意：每次更换试管类型（例如具有不同的外径、不同的底部形状或不同的材料）时，都必须对设备进行校准。