培养基的种类繁多，但制备的方法大同小异，一般可分为6个步骤：用水、称量、溶解复水、灭菌、pH测定、保存。

注意事项：
1、必须选用专门纯净水或者经消毒过后的无菌水。水中电阻率需大于300000Ω/cm（在25℃），重金属含量需小于0.05mg/L。

2、培养基进行复水的容器不得用铜锅或铁锅，放置离子混入培养基中，影响微生物的生长。

3、容器的体积须大于复水后培养基总体积的2倍，预防出现溢出情况。

4、在对培养基进行加热时，若培养基内含有琼脂粉成分，则需要将其充分浸泡一段时间。加热的过程中不断进行搅拌防止出现培养基结底炭化从而造成成分损害。部分培养基则需要使用沸水进行加热，预防发生局部烧焦及沸腾溢出。

5、琼脂类培养基进行再融化时应使用沸水浴或流动蒸汽进行加热，最多只能加热两次，第二次再融化后仍未用完的培养基应弃去。

6、而当对培养基实施灭菌时，需严格按照说明规范操作。通常均会采用121℃的15 min高压灭菌，但是也不能盲目按照说明的时间进行，需结合实际情况，合理调节灭菌时间，防止出现培养基灭菌过度而造成的成分变性。

7、为有效体现培养基其生物学特性，其制备生长及繁殖需要特定的PH范围。当在实施培养基灭菌过程中，往往PH值会因灭菌而产生改变。可采用适量的10% NaOH及盐酸10% HCL对培养基的PH值进行适当调节，但也应注意调节次数不宜过多。

经实验室配制或由生产厂生产的培养基的质量高度依赖于其如何制备，采用不适宜方法制备的培养基将影响微生物的生长或复苏，从而影响试验结果的可靠性。因此选择在制备过程中选择一个稳定可靠，专业度高的仪器是非常有必要的。