点成分享 | 微生物浊度测量技术:比浊仪校准的最佳实践与策略

点成分享 | 微生物浊度测量技术:比浊仪校准的最佳实践与策略

比浊仪通过检测悬浮液中微生物对光的散射程度来反映微生物含量。微生物浓度越高,透过的光越少,散射的光越多。因此,微生物浓度与透光度成反比,与吸光度成正比。该技术广泛应用于细菌浊度测定、抗生素药敏实验等微生物检测领域。

麦氏比浊仪

点成的DEN-1 和 DEN-1B 麦氏比浊仪是专为细菌浊度测定设计的仪器。它们的量程范围分别为 0.3-5.0 McF(1×10⁸-15×10⁸ 细胞/ml)和 0.0-6.0 McF(0-18×10⁸ 细胞/ml)。在极限条件下,这两款仪器的测量范围可扩展至 15.0 McF,但在这种情况下,测量误差会增加。

应用场景:

● 发酵过程中细胞浓度的测定

● 微生物对抗生素的敏感性分析等

比浊仪校准

DEN-1 和 DEN-1B 出厂时经过精确的预校准,并支持用户根据需要进行多点自校准。使用不同材质或直径的试管时,需进行重新校准以确保测量的准确性。比浊仪使用 McFarland 标准单位来表示溶液浊度,默认校准范围为 0.5-5.0 McF(DEN-1B 为 0.0-6.0 McF)。用户可以使用点成提供的标准校准溶液,或自行配置硫酸钡悬浮液以确保准确校准。

校准液的获取与使用建议

准确的校准对于比浊仪的测量精度至关重要。根据实验需求,用户可以选择不同的校准方法:
● 推荐方法:使用厂家提供的 CLSI 标准乳胶颗粒悬浮液,该悬浮液具有优异的稳定性和耐用性,适合细菌悬浮液的标准化制备
● 可选方案:用户也可以选择国内如中国计量院(NIM-RM2705)等商业标准校准物质,确保校准精度。
● 自制方案:实验室可以自行配置硫酸钡悬浮液,但需严格控制配制的精度,以确保校准结果的准确性。

McFarland 标准与校准注意事项

比浊仪的预校准是基于使用 16 mm 外径玻璃管,并在设备关机时保存校准数据。用户也可以根据实验需求,在 0.5-5.0 McF(或 DEN-1B 的 0.0-6.0 McF)范围内进行多点校准。McFarland 乳胶标准校准液在稳定性和均匀性上优于传统硫酸钡标准品,减少了结块问题并延长了保质期。
标准溶液校准建议使用点成提供的标准品,确保最大的校准可靠性。如果使用自制溶液或其他商业标准产品,需根据实际应用场景进行相应调整。在校准过程中,特别是在使用不同颗粒大小或光学特性不同的材料时,需要仔细考虑这些因素对光散射和吸收的影响
比浊仪支持用户自行校准,特别是在更换试管或改变测试条件时,建议校准至少两个或更多点。校准液规格从 0.0 McF 到 4.0 McF 不等,用户可根据实验需求选择合适的校准液。校准过程应遵循《JJF 1825-2020 麦氏细菌浊度分析仪校准规范》中的相关规定,以确保校准符合行业标准,并保证仪器的测量精度。

比浊仪校准Q&A

为什么使用麦氏乳胶标准代替传统的硫酸钡标准?
麦氏乳胶标准校准液使用聚苯乙烯颗粒,解决了硫酸钡标准的稳定性和重复性问题。它具有更高的均匀性和耐用性,减少了结块问题,并延长了保质期。

 

校准液如何保存以保持稳定性?

麦氏乳胶标准校准液需在15°C至30°C之间保存,避免冻结或过热。在这些条件下,校准液可保持稳定,直至标签上注明的过期日期。

使用自制校准液的可行性如何?

自制校准液是可行的,但配制时需严格控制精度,尤其是硫酸钡悬浮液等标准溶液。为了确保最大可靠性,建议使用商用或厂家提供的标准品。

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