动态细胞培养是指在施加机械应力的情况下进行细胞体外培养。控制细胞生长过程中液体（如培养基）流过细胞的能力引起了人们的极大兴趣。使用微流体仪器可以非常精确地产生流速，这是更好地复制细胞正常生存的动态环境的理想方法。培养基微流体灌注模拟血液流动，允许营养物质交换和废物清除，同时还会给细胞增加剪切应力。
优势
在本应用说明中，我们描述了如何灌注细胞以进行动态细胞培养。使用自动 OB1 压力控制器进行灌注，使用各种流量曲线，包括恒定流量或间歇性、稳定速率或脉动，或创建自定义曲线，例如模拟心律。还请阅读我们关于动态细胞培养的自动细胞接种和细胞染色的应用说明。
动态细胞培养的一些主要应用包括：
- 活细胞成像（例如钙成像、FISH）
- 药物筛选
- 剪切应力
- 细胞滚动粘附试验
- 免疫反应
- 癌症侵袭和转移
- 生理和疾病模型
- 芯片上的器官
- 血管形成和闭塞（动脉粥样硬化）
- 骨稳态和疾病（骨质疏松症）
微流体灌注装置的组件列表
细胞和生物学包
专为灌注而设计的微流体室
流量调节器 OB1 Mk3+
多路复用器
微流控气泡阱
流量传感器
管路、接头和储液槽
歧管 9 端口
微流控灌注设置图
硬件
- 压力和流量控制器：施加给定压力以产生稳定且无脉动的流量。
- 储液器：包含您的培养基、缓冲液、染色剂、细胞悬浮液或样品。有各种盖子尺寸可供选择，从 Eppendorf 到瓶子。
- 旋转阀（MUX 分配器）：选择注入的液体。
- 流量传感器：实时监控和控制流速。
- 气泡捕集器：捕获并去除气泡，避免气泡进入您的芯片，干扰流动和粘附细胞。
- 灌注室或微流体芯片：包含您的细胞。与显微镜兼容。
- 计算机：使用我们的软件控制所有参数，并通过创建注射序列自动化您的实验。
化学品
- 细胞：HeLa（1×106 细胞/mL）
- 培养基：DMEM 高葡萄糖、10% FBS、青霉素/链霉素（100 U/mL；100 µg/mL）
- 洗涤缓冲液：PBS
- 活细胞/死细胞染色剂：钙黄绿素/Hoechst/碘化丙啶
微流体灌注方案
按照我们的指南在微流控芯片中接种和粘附细胞。
提示：为确保牢固附着，在开始流动之前，接种后让细胞停留 12-18 小时
灌注：将流切换到含有培养基 1 的储液器。
提示：在安排连续灌注时，使用阶梯梯度缓慢增加流速至所需值
切换培养基：如果需要，将流切换到含有培养基 2 的储液器。
结论
HeLa 细胞附着和增殖（t=2h、18h、26h）。灌注（以 20 µL/min 间歇，每小时 10 分钟）从 t=18h 开始。
提示和技巧
我们的专家团队可以帮助您进行实验，改进特定应用的设置配置，并解决您可能遇到的任何问题。
我们可以帮助您：
- 使用 ESI 调度程序自动化流程
- 创建用于细胞间化学通信的再循环设置
- 减少或利用流动剪切应力
- 添加 MUX 再循环以实现单向再循环
想要了解更多信息，请联系我们
