细胞计数是常规细胞培养和获取准确可靠实验数据的关键步骤。近年来,随着高性价比自动化细胞计数仪的普及,这类设备应用日益广泛。然而,为避免耗材成本,许多研究者仍采用血球计数板。为此,AlignedGenetics(原 Logos Biosystem)研发了适配 LUNA™系列自动化细胞计数仪的可重复使用载玻片(LUNA ™可重复使用载玻片,货号 L12008)。本文将对 LUNA™可重复使用载玻片、血球计数板及一次性载玻片的细胞计数结果进行对比分析。
01 引言
LUNA™ 可重复使用载玻片是什么?
细胞计数是常规细胞培养和获取准确可靠实验数据的关键步骤。近年来,随着高性价比自动化细胞计数仪的普及,这类设备应用日益广泛。然而,为避免耗材成本,许多研究者仍采用血球计数板。为此,Aligned Genetics(原 Logos Biosystem)研发了适配 LUNA™系列自动化细胞计数仪的可重复使用载玻片(LUNA ™可重复使用载玻片,货号 L12008)。本文将对 LUNA™可重复使用载玻片、血球计数板及一次性载玻片的细胞计数结果进行对比分析。
02 结果
LUNA™可重复使用玻片和血细胞计数器的细胞计数准确性比较
- LUNA™可重复使用玻片和血细胞计数器的细胞计数准确性比较
为评估 LUNA™可重复使用载玻片的计数准确性,将其获取的总细胞浓度数据与血球计数板手动计数结果进行对比。
在测试浓度范围内,二者结果呈现高度相关性(R² > 0.999,意味着在整个测试浓度范围内,自动化计数没有引入系统性偏移)(图 1)。
当细胞浓度较高时(>2×10⁶个细胞/mL),LUNA™载玻片的数据一致性优于血球计数板。这可能归因于 LUNA-II™在可重复使用载玻片上的检测面积大于血球计数板的人工计数区域。
图 1 LUNA™可重复使用玻片和血细胞计数器的细胞计数结果比较
- LUNA™可重复使用载玻片的明场计数性能,与一次性载玻片有差异吗?
为验证该载玻片在自动化明场计数中的适用性,分别使用台盼蓝染色的细胞样本对可重复使用载玻片与一次性载玻片进行测试,并通过 LUNA™和 LUNA-II™系统计数。如图 2 所示,不同载玻片或设备获得的总细胞、活细胞及死细胞浓度均无显著差异,换用可重复使用载玻片不会改变计数结果本身,历史数据的可比性得以保留。
图 2:LUNA™可重复使用玻片与台盼蓝染色自动细胞计数器的兼容性。(顶部)LUNA™系列自动细胞计数器捕获和标记的细胞图像;使用 LUNA™可重复使用载玻片和一次性载玻片的(底部)细胞计数结果。
03 材料和方法
实验方法(可复现)
- LUNA™可重复使用载玻片与血球计数板的细胞计数准确性对比
为评估 LUNA™可重复使用载玻片的计数准确性,将其细胞计数结果与血球计数板(Neubauer 计数网格,Marienfeld 品牌)手动计数结果进行对比。
实验采用系列稀释的细胞悬液与等体积 0.4%台盼蓝染液混合,分别取 10 µL 混合液加入 LUNA™载玻片及玻璃血球计数板。血球计数板通过 iRiS™数字细胞成像系统拍摄图像,人工计数 Neubauer 网格四角大方格内的细胞;LUNA™载玻片样本则使用 LUNA-II™自动细胞计数仪分析。所有实验均重复三次。
- LUNA™可重复使用载玻片在明场与荧光自动计数系统中的性能评估
通过台盼蓝(明场)与吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI,荧光)两种染色方案评估载玻片性能, 所有试验均重复三次:
- 在明场计数方面,将细胞与台盼蓝 1:1 混合后,分别加载至可重复使用载玻片与一次性载玻片,使用 LUNA™、LUNA-FL™及 LUNA-II™三款设备计数
- 在荧光计数方面,取 18 µL 细胞悬液与 2 µL AO/PI 染液混合,加样 10 µL 至载玻片后,通过LUNA-FL™荧光自动细胞计数仪分析
- LUNA™可重复使用载玻片的荧光染色计数性能评估
为评估该载玻片在自动化荧光计数中的适用性,使用 LUNA-FL™荧光细胞计数仪对吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)染色的细胞进行检测。所有参数均未呈现显著差异(图 3)。
图 3. LUNA™ 可重复使用载玻片与 AO/PI 染色自动细胞计数仪的兼容性验证(上:LUNA-FL™ 采集的细胞图像;下:两种载玻片的计数结果对比)
04 结论
LUNA™可重复使用载玻片的价值
LUNA™可重复使用载玻片实现自动化细胞计数——优于血球计数板的五大优势。其替代价值体现在:
- 零学习成本–操作方式与血球计数板相似
- 可重复使用,经济划算
- 细胞计数结果准确
- 消除人为误差,告别繁琐计算流程
- 支持自动对焦计数(适用于 LUNA-II™ 和 LUNA-II YF™ )
关于点成生物与 Aligned Genetics(原 Logos Biosystems): LUNA™可重复使用载玻片是 Aligned Genetics的全自动细胞计数仪产品,点成生物是官方授权的合作伙伴,提供中国市场的技术支持、应用验证与售后服务。



