1 引言
在生物医学研究和生物制造等领域，细胞尺寸可是个关键参数。它就像细胞的 “健康密码”，能反映细胞的健康状况和质量。在生物制造过程中，细胞尺寸更是评估批次培养细胞质量、细胞治疗原料质量的重要依据。所以，能精准测量细胞尺寸的自动细胞计数仪，对相关研究和生产来说至关重要。
点成 LUNA-III™自动细胞计数仪，继承了 LUNA™系列设备的标准尺寸分选功能，不仅能高精度地测量细胞尺寸，还能在计数过程中及计数后，对细胞群体进行分类分析。今天，就来给大家详细讲讲，这款仪器在六种 NIST 可溯源粒径标准及 3T3 细胞系上的测量精度和尺寸分选能力。
2 材料与方法
#细胞系与试剂 #
本次实验选用 3T3 细胞系，培养基是含有 10% 胎牛血清和 1% 的 DMEM。我们用 0.4% 台盼蓝（货号 T13101）来评估细胞存活率。另外，为了验证仪器尺寸测量的精度，还准备了六种 NIST 可溯源粒径标准，它们的粒径分别是 9.98、20.85、30.04、43.33、50.00 和 57.43 µm。
#基于 NIST 可溯源粒径标准的精度验证 #
NIST 可溯源粒径标准由美国国家标准与技术研究院(NIST)提供，可作为公认的测量基准｡使用这些标准颗粒评估点成 LUNA-III™ 的测量精度,结果表明其尺寸测量准确度达 95.2% 以上，进一步验证了 其在尺寸测量中的高精度(图1)｡
图 1:(A)点成LUNA-III™ 计数的NIST 可溯源粒径标准(NT27N､NT30N､NT32N､NT33N､NT34N､#64200)图像,红色圆圈标示检测出的颗粒｡(B)表格对比NIST 标准粒径尺寸与点成LUNA-III™测量值及其精度百分比｡(C)散点图显示了点成LUNA-III™测量值与NIST 标准值的线性关系,R² 值达0.9999,表明其具备极高的线性度和准确性｡
#细胞尺寸测量 #
为了评估点成LUNA-III™的尺寸测量准确性，我们混合了六种NIST可溯源粒径样本，并将计数范围设定在 1 µm 至 90 µm 之间。计数完成后，系统生成细胞浓度与尺寸分布直方图，并精准分类各尺寸标准颗粒。利用灵活的尺寸分选功能，可在计数后立即调整尺寸范围，对目标尺寸进行精确标定，使测量准确度超过98%。
图 2：点成LUNA-III™在不同尺寸范围（8~12 µm、18~22 µm、28~32 µm、41~45 µm、48~52 µm、55~59 µm）内对NIST标准颗粒进行检测与尺寸分选的示例图，每个图像均配有相应的直方图，以展示粒径分布情况。
#3T3 细胞尺寸测量 #
为了评估点成LUNA-III™根据尺寸筛选3T3细胞（已知尺寸约18 µm）的能力，我们设定了多个尺寸分选范围7~24 µm、1~11 µm、12~24 µm、16~20 µm（图 3）。结果显示，点成LUNA-III™能精准检测并筛选符合各尺寸范围的3T3细胞，同时相应的直方图也清晰展示了细胞尺寸分布情况，证明其在不同尺寸范围内均能实现可靠、精准的测量。
图 3：点成LUNA-III™计数的3T3细胞图像，显示细胞在 7~24 µm、1~11 µm、12~24 µm和16~20 µm之间的尺寸分选情况，橙色圆圈标示检测到的细胞。相应直方图展示了各尺寸范围内的细胞分布情况。
3 结论
点成LUNA-III™自动细胞计数仪可提供精准、可靠的细胞尺寸测量。在NIST可溯源粒径标准的验证下，其测量准确度达95.2%以上，并成功对混合粒径颗粒及3T3细胞进行精准分类和尺寸分选，准确度超过98%。
点成LUNA-III™具备以下优势：
精准测量：适用于各种颗粒尺寸和细胞类型
可靠分选：确保细胞群体的精确分类
高重复性：测量结果一致性强
这些优势使点成LUNA-III™自动细胞计数仪成为细胞尺寸、健康状况和质量评估的理想工具。
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